使用高效液相色谱荧光检测法测定食品中的低聚半乳糖
2024-11-0598低聚半乳糖 (GOS) 是一种天然存在的功能性低聚糖。动物乳汁中含有微量 GOS;人乳中的 GOS 含量较高,且婴儿体内双歧杆菌菌群的建立在很大程度上依赖母乳中的 GOS 成分。GOS 是一种重要的益生元,能够选择性地促进人体肠道内固有的双歧杆菌等有益菌的增殖,从而发挥诸多生理功能,包括:抑制肠道内腐败菌的生长,减少有害代谢产物的形成,预防肠癌的发生,防止便秘,降低血清胆固醇含量,促进矿物元素吸收,预防龋齿,增加机体免疫力,以及改善脂质代谢等。目前,GOS 作为一种新型功能食品添加剂,在食品加工业中的应用非常广泛。
低聚半乳糖分子结构一般是在半乳糖或葡萄糖分子上连接有 1–7 个半乳糖基,即 Gal-(Gal)n-Glc/Gal(其中 n 为 0–6)。工业用低聚半乳糖多以乳糖或乳清为原料,通过 β-半乳糖苷酶的转糖苷作用制得。不同的 β-半乳糖苷酶和生产工艺影响产品中低聚糖的结构和比例。目前,从低聚半乳糖中分离出且结构得到确定的组分已达 17 种。
现有文献报道的检测方法大多基于 AOAC 2001.02 方法。采用β-半乳糖苷酶使样品中的 GOS 和乳糖水解,然后计算水解前后由GOS 产生的半乳糖含量的变化和转化系数,从而得到样品中 GOS 的含量。但由于样品中乳糖同样被酶水解产生半乳糖,因此使半乳糖含量变化的计算结果产生误差。同时,该方法也未给出转化系数计算方法,因此不能够解决高乳糖含量对食品中 GOS 测定的影响。本文参照 GB 5009.289-2023,建立了一种在 GOS 标记后测定食品中的 GOS 含量的方法。该方法采用高分辨质谱或三重四极杆质谱,对不同聚合度的 GOS 保留时间段进行辅助判定。
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